卵白由几许氨基酸脱水缩合摆设组成，含有一个游离的氨基（N端）和一个游离的羧基（C端）。C端与N打量同，在卵白质分子结构分析中具有迫切的地位，是卵白质竣工一级结构的必须信息万博官方网站，对C端序列进行测定具有迫切的意旨。

北京百泰派克生物科技有限公司基于CNAS/ISO9001双重质地认证体系，把柄肽图分析（质谱法）旨趣，诞生了针关于不同类别生物成品的卵白C端序列分析处事，可结束对卵白、抗体、疫苗、多肽、重组胶原卵白等生物成品C端序列的测定。

时间旨趣

当今尚未开拓出雷同于Edman降解的C端序列测定时间，因此卵白C端序列的确证处事仍然所以质谱平台为基础。把柄靶卵白表面序列信息聘请互补性好的两种卵白酶酶切卵白，产生两个长度不同关联词符合离子化的C端肽段，经质谱检测，互相考证，最终敬佩卵白C端序列。

附常见卵白酶酶切要求及位点：

实验仪器

• 纳升级高效液相色谱仪：Easy-nLC 1200；

• 组合型四极杆-Orbitrap质谱仪：Q Exactive™ Hybrid Quadrupole-Orbitrap™ Mass Spectrometer。

案例露出

样品卵白历程妥当的卵白酶酶切之后变成长度大多在6-28aa的肽段，干涉质谱分析后产生的总离子流谱图如下：

样品总离子流谱图（TIC）

（横坐标为时刻（min），纵坐标为相对信号强度）

通过一级质谱图不错赢得竣工肽段的分子量，mass=(m/z-1)*z

C端肽段一级质谱图

（横坐标为检测到的m/z值，纵坐标为相对信号强度）

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二级质谱图赢得的是肽段的碎屑离子m/z值，竣工肽段在质谱中从肽键位置被打碎为碎屑离子，聚拢肽段的N端的为b离子，聚拢C端的为y离子（举例二级图中的肽段KTSTSPLVKSF, 二级碎裂之后，碎屑离子K和TSTSPLVKSF永诀为b1和y10离子，碎屑离子KT和STSPLVKSF永诀为b2和y9离子）。表面的碎屑离子m/z与施行二级图中的检测值匹配到的越多，真确度越高。通过肽段二级碎裂片断信息敬佩C端肽段序列

肽段二级质谱图

（横坐标为检测到的m/z值，纵坐标为相对信号强度）

施行花式中会至少使用两种互补的卵白酶对靶卵白进行酶切，不错赢得两条长度不同的C端肽段，通过关于两条C端肽段序列的互相考证，最终敬佩卵白的C端序列信息。

常见典型问题

问题1：卵白历程酶切后会在固定的位点断开，怎么敬佩C端的肽段即是卵白C端呢？

有业内人士表示，银行诱导捆绑销售，既损害客户自身知情权和自主选择权，又违反银行业务规范及监管规则。他建议，投资者应了解自己的权益和义务，可保留相关证据及时采取措施维权。

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回应：数据分析的时候会挑选N端为酶切位点而C端不是酶切位点的肽段，保证肽段是酶切形成的而不是立时的杂质肽段，同期保证肽段终端与对比终端是结伙的。

问题2：要是分析效果惟有C终端为酶切位点的肽段，怎么朝上阐述C端具体位置？

回应：这种效果通常是两种情况形成的。第一种情况是卵白的C规则好是酶切位点，咱们不错通过不同酶切同期分析抛弃这种情况。第二种是卵白C端离该酶切位点很近或很远，酶切之后剩余片断太短或太长万博官方网站，碎裂情况太差，无法被分析软件识别到，咱们不错诞生一个梯度数据库，每个序列比上一下序列多一个氨基酸，诓骗梯度数据库重新比对分析。